RESUMEN Y EXPLICACIÓN LA PRUEBA
La leishmaniasis visceral, o Kala-azar, es una infección diseminada causada por varias subespecies de L. donovani.La Organización Mundial de la Salud (OMS) estima que la enfermedad afecta aproximadamente a 12 millones de personas en 88 países.Se transmite a los humanos por la picadura de los flebótomos Phlebotomus, que adquieren la infección al alimentarse de animales infectados.Aunque es una enfermedad que se encuentra en los países pobres, en el sur de Europa se ha convertido en la principal infección oportunista en pacientes con SIDA.La identificación del organismo L. donovani en la sangre, la médula ósea, el hígado, los ganglios linfáticos o el bazo proporciona un medio definitivo de diagnóstico.Detección serológica de anti-L.donovani IgM resulta ser un excelente marcador para la leishmaniasis visceral aguda.Las pruebas utilizadas en clínica incluyen ELISA, anticuerpos fluorescentes o pruebas de aglutinación directa 4-5.Recientemente, la utilización de la proteína específica de L. donovani en la prueba ha mejorado drásticamente la sensibilidad y la especificidad.
La prueba rápida combinada IgG/IgM de Leishmania es una prueba serológica basada en proteínas recombinantes que detecta anticuerpos IgG e IgM contra L. Donovani simultáneamente.La prueba proporciona un resultado fiable en 15 minutos sin ningún instrumento.
PRINCIPIO
La prueba rápida Leishmania IgG/IgM es un inmunoensayo cromatográfico de flujo lateral.El casete de prueba consta de: 1) una almohadilla de conjugado de color burdeos que contiene antígeno recombinante de L. donovani conjugado con oro coloidal (conjugados de Leishmania) y conjugados de IgG-oro de conejo, 2) una tira de membrana de nitrocelulosa que contiene dos bandas de prueba (bandas T1 y T2) y una banda de control (banda C).La banda T1 está recubierta previamente con IgM antihumano monoclonal para la detección de anti-L.donovani IgM, la banda T2 está precubierta con reactivos para la detección de anti-L.donovani IgG, y la banda C está recubierta con IgG anti-conejo de cabra.
Cuando se dispensa un volumen adecuado de muestra de prueba en el pozo de muestra del casete, la muestra migra por acción capilar a través del casete.La IgM de L. donovani, si está presente en la muestra, se unirá a los conjugados de Leishmania.Luego, el inmunocomplejo es capturado en la membrana por el anticuerpo IgM anti-humano recubierto previamente, formando una banda T1 de color burdeos, lo que indica un resultado positivo de la prueba de L. donovani IgM.La L. donovani IgG, si está presente en la muestra, se unirá a los conjugados de Leishmania.El inmunocomplejo luego es capturado por los reactivos pre-recubiertos en la membrana, formando una banda T2 de color burdeos, lo que indica un resultado positivo de la prueba de L. donovani IgG.
La ausencia de cualquier banda T (T1 y T2) sugiere un resultado negativo.La prueba contiene un control interno (banda C) que debe exhibir una banda de color burdeos del inmunocomplejo de cabra anti conejo IgG/conejo IgG-oro conjugado independientemente del desarrollo de color en cualquiera de las bandas T.De lo contrario, el resultado de la prueba no es válido y la muestra debe volver a analizarse con otro dispositivo.
